紫外可見分光光度技術的基本應用
1.測定溶液中物質的含量 可見或紫外分光光度法都可用于測定溶液中物質的含量。測定標準溶液 (濃度已知的溶液) 和未知液(濃度待測定的溶液)的吸光度,進行比較,由于所用吸收池的厚度是一樣的。也可 以先測出不同濃度的標準液的吸光度,繪制標準曲線,在選定的濃度范圍內標準曲線應該是 一條直線,然后測定出未知液的吸光度,即可從標準曲線上查到其相對應的濃度。含量 測定時所用波長通常要選擇被測物質的大吸收波長,這樣做有兩個好處:
(1)靈敏度大, 物質在含量上的稍許變化將引起較大的吸光度差異;
(2)可以避免其他物質的干擾。
2.用紫外光譜鑒定化合物 使用分光光度計可以繪制吸收光譜曲線。方法是用各種波長不同的單色光分別通過某一濃度 的溶液,測定此溶液對每一種單色光的吸光度,然后以波長為橫座標,以吸光度為縱座標繪 制吸光度一波長曲線,此曲線即吸收光譜曲線。各種物質有它自己一定的吸收光譜曲線,因 此用吸收光譜曲線圖可以進行物質種類的鑒定。一定物質在不同濃度時,其吸收光譜曲線 中,峰值的大小不同,但形狀相似,即吸收高峰和低峰的波長是一定不變的。紫外線吸收是 由不飽和的結構造成的,含有雙鍵的化合物表現出吸收峰。紫外吸收光譜比較簡單,同一種 物質的紫外吸收光譜應完全一 致,但具有相同吸收光譜的化合物其結構不一定相同。除了特 殊情況外,單獨依靠紫外吸收光譜決定一個未知物結構,必須與其他方法配合。紫外吸收光 譜分析主要用于已知物質的定量分析和純度分析。
3.比較大吸收波長吸收系數的一致性 由于紫外吸收光譜只含有2~3個較寬的吸收帶,而紫外光譜主要是分子內的發色團在紫外區 產生的吸收,與分子和其它部分關系不大。具有相同發色團的不同分子結構,在較大分子中。
4.反應動力學研究 借助于分光光度法可以得出一些化學反應速度常數,并從兩個或兩個以上溫度條件下得到的 速度數據,得出反應活化能。
5.純度檢驗 紫外吸收光譜能測定化合物中含有微量的具有紫外吸收的雜質。如果化合物的紫外可見光區 沒有明顯的吸收峰,而它的雜質在紫外區內有較強的吸收峰,就可以檢測出化合物中的雜質。
6.氫鍵強度的測定 不同的極性溶劑產生氫鍵的強度也不同,這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫 鍵強度,以確定選擇哪一種溶劑。
7.絡合物組成及穩定常數的測定 金屬離子常與有機物形成絡合物,多數絡合物在紫外可見區是有吸收的,我們可以利用分光光度法來研究其組成。